如何进行细胞的传代培养?

　　说到细胞的传代培养，相信了解过生物学的同学们都不会陌生，一般可分为：传代前准备、胰蛋白酶消化、吹打分散细胞、分装稀释以及继续培养这五个步骤。其实对于大部分的细胞培养来说，这五个步骤可以说是耳熟能详，我们就不一一赘述了。今天，我们和大家具体聊聊有关细胞传代培养过程中需要注意的一些问题。

　　1、如何选择胰蛋白酶

　　我们知道，胰蛋白酶有的含有EDTA，有的则不含，所以，具体选择需要结合具体需求来进行。其实EDTA就是一种螯合剂，主要用于与金属离子的结合，所以，含有EDTA的胰蛋白酶除了具有消化作用外，还可以螯合金属离子。意思就是说，我们在选择胰蛋白酶时，如果需要进行细胞离解和分离操作则选择含EDTE的，如果仅仅只需要传代操作，则选择不含EDTA的;

　　2、如何掌控好消化时间

　　消化时间的长短在直接上制约着细胞的生长和状态，时间过长会导致细胞受损甚至死亡，消化时间过短，会导致细胞无法完全分散，影响细胞的生长。而细胞具体多长时间消化，取决于胰蛋白酶以及温度、密度等环境因素。

　　通常情况下，我们需要将蛋白放置于37度环境下，加入提前准备好的胰蛋白酶后，放入培养箱进行消化。一般来说，传代密度一般在70-80之间;

　　3、其他一些需要关注的事项

　　在添加胰蛋白酶前，需要使用PBS进行润洗，但是需要将PBS清洗干净后再加胰蛋白酶。而加入的胰蛋白酶量一般以没过培养瓶底部即可。如果细胞解离过快，可以考虑将培养瓶竖起来;

　　总的来说，细胞的传代培养相对来说简单一些，无论是过程还是操作，只要将一些细节做好了，其培养相对来说都不会多困难。当然了，在培养过程中也需要时刻关注其培养情况，根据实际情况来进行调整，这样才能在更大程度上保证细胞的培养。武汉普健生物专业为广大用户提供细胞培养服务，如果您有相关需求，欢迎来电咨询。