普健生物-盘点裂解液的组分和组成

普健生物 http://kx.atagenix.cn/ 2022-07-20 

裂解液在生物行业中的使用可谓非常广泛,主要由从动物组织或是动物细胞中提取的可溶性蛋白组成,主要用于蛋白的提取。

  裂解液在生物行业中的使用可谓非常广泛,主要由从动物组织或是动物细胞中提取的可溶性蛋白组成,主要用于蛋白的提取。那么,大家知道裂解液一般由哪些成分组成呢?今天普健生物就在这里和大家具体聊聊。

  其实裂解液的组成成分多种多样,针对不同的需求,选择的组分也各不相同,不过,一般都包含:缓冲系统、盐离子、离液剂、蛋白酶抑制剂、还原剂这五种。

  1. 缓冲系统。一般来说,裂解液的PH值过高或是过低都会造成蛋白质变性析出或是会直接水解,所以,我们一般都会采用缓冲液来进行pH值降低。常用的缓冲剂为Tris-HCI缓冲液,因为其不易与其他离子融合,而且其兼容性好,使得其成为缓冲液的首选;

  2. 盐离子。在我们实现细胞的质膜分离时,也常常会使用到盐离子溶液(150mM NaCl)。当盐离子浓度达到一定程度后,会造成细胞破裂,而浓度足够高的时候,还可以实现蛋白沉淀的现象;

  3. 离液剂。离液剂是一类可以弱化蛋白疏水性的试剂,常用的有两种:尿素和除垢剂。

  4. 蛋白酶抑制剂。因为组织或细胞内都会存在大量的蛋白酶,在我们提取蛋白的过程中,蛋白酶也会被释放出来,会消化掉蛋白,所以,需要通过一些试剂来抑制这类蛋白酶的出现。常用的蛋白酶抑制剂有:PMSF、Aprotinin、 Leupeptin、 Pepstatin,AEBSF-HCL。因为PMSF对不同的蛋白酶都有着极好的抑制作用,而且抑制效果较好,所以,其使用也最为广泛。

  5. 还原剂。一些蛋白质在制备的过程中会形成二硫键,在裂解液中引入还原剂则会有效还原二硫键,这样,就会使得蛋白以单体的形式纯在。常见的还原剂蛀牙有DTT和BME,两种还原剂的使用都非常的广泛,但是DTT溶液不稳定,需要现配,BME容易挥发,需要做好防护工作;

  总的来说,裂解液中的各种物质都有着各自的作用,我们在配置裂解液的时候,可以根据需求来进行选择,这样才能得到最适合我们需求的裂解液。普健生物作为一家老牌的生物科研公司,为广大用户提供各类蛋白抗体服务,如果您有相关需求,欢迎来电咨询。

上一篇:盘点WB中的一些常见问题

下一篇:如何进行细胞的传代培养?