蛋白纯化过程中的主要过程盘点

　　蛋白纯化是蛋白表达过程中的重要步骤，是实现后期蛋白检测、使用等操作的重要手段，使得其在生物化学研究中有着广泛的使用。下面，普健生物和大家具体聊聊有关蛋白表达、纯化的一些事。

　　蛋白纯化简单来说，就是结合蛋白的物理化学特性(分子大小、电荷、特异性结合等特点)将其从混合溶液中提取出来的一种手段。因此，我们可以采用亲和层析、离子交换层析、凝胶过滤层析、疏水相互作用等手段来实现蛋白纯化。

　　那么，蛋白纯化过程中，具体有哪些事呢?

　　1、标签选择

　　蛋白标签的作用就是用来更好地实现蛋白纯化的方式之一，其能够对分子量、可溶解性、蛋白折叠等过程造成影响，使得纯化事半功倍;

　　2、载体构建

　　在选择好标签之后，我们就需要构建载体了。目前可供使用的载体很多，可以根据蛋白的特性灵活选择。同时，需要设计好启动子和终止序列;

　　3、宿主选择

　　目前常用的蛋白表达系统主要有昆虫杆状病毒表达系统、酵母表达系统、哺乳动物表达系统、枯草芽孢杆菌表达系统以及大肠杆菌表达系统五大系统。结合目的蛋白的特性，选择合适的宿主来进行表达;

　　4、条件优化

　　除了使用合适的培养基外，还需要而且需要控制好表达温度，并做好PH值控制，及时补充营养物质并去除代谢废物;

　　5、纯化柱选择

　　对于每一个标签来说，其都有对应的纯化材料，这样才能在更大程度上保证蛋白的纯化。结合蛋白的物理化学特性，选择合适的纯化柱，比如常用的镍柱;

　　蛋白纯化需要结合目的蛋白的特性来进行标签选择，只有选择好了合适的蛋白标签，才能让纯化过程变得更加的容易。当然了，对于不同的蛋白来说，其各种特性会造成一次纯化无法达到需求，这个时候就需要选择多种方式来实现纯化。武汉普健生物专业为广大用户提供蛋白纯化服务，如果您有相关需求，欢迎来电咨询。