什么是稳定细胞株筛选技术?

普健生物 http://kx.atagenix.cn/ 2023-07-03 

前面我们和大家具体介绍过稳定细胞株,大家可以点击“什么是稳转细胞株?如何构建稳转细胞株?”具体查看。但是,今天我们又接触到一个新的词:稳定细胞株筛选。

  前面我们和大家具体介绍过稳定细胞株,大家可以点击“什么是稳转细胞株?如何构建稳转细胞株?”具体查看。但是,今天我们又接触到一个新的词:稳定细胞株筛选。可能很多人会很好奇,构建稳定细胞株不就好了,为什么还需要再次进行筛选呢?今天,普健生物就和大家具体聊聊。

  其实稳定细胞株筛选的目的,就是为了获得能够长时间稳定表达的细胞株,通过挑选出其中的优质株,稳定培养,以达到稳定获得目的基因蛋白的目的。其具体过程如下:

  1. 载体构建:将目标基因或蛋白质的编码序列克隆到适当的表达载体中,该载体通常含有选择标记基因,如抗生素抗性基因。

  2. 转染细胞:将构建好的表达载体导入目标细胞中,通常使用转染技术,如细胞病毒转染、电穿孔或化学法。

  3. 选择标记物筛选:在转染后的细胞中,添加适当的选择标记物,如抗生素,以选择只有集成了目标基因或蛋白质的细胞。

  4. 稳定性筛选:经过选择标记物筛选的细胞被进一步培养和扩增,以确保目标基因或蛋白质的稳定表达。在这个过程中,通常会监测目标基因或蛋白质的表达水平,并选择具有高表达稳定性的细胞株。

  5. 单克隆化:经过稳定性筛选后,可以选择单个细胞进行单克隆化,即将单个细胞分离并独立培养,以获得稳定表达目标基因或蛋白质的单克隆细胞株。

  总的来说,过程本身并不是多么的复杂,也就那么几个步骤。但是,也不是说任意一家公司都可以生产的。因为其中涉及到的技术需求非如上几句话就能囊括得聊的,具体操作的复杂程度也不是我们所能想象的,需要有严格的技术支持才行。普健生物专业为广大用户提供稳定细胞株筛选服务,如果您有相关需求,欢迎来电咨询。

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