稳定细胞株-解锁生物制药瓶颈的几大问题

　　　　稳定细胞株是现阶段实现生物制药大规模生产的重要手段，它不仅有效降低了药物的制备成本，更是在制备时间和困难度上得到了极大的改善。最主要的是，它能够降低不同批次间的差异性，进一步提升药品的质量。下面，普健生物和大家具体聊聊有关稳定细胞株制备抗体的相关内容。

　　Q1：稳定细胞株和瞬时转染的区别在哪里?

　　超过30代后依然能够保证其遗传稳定;

　　批次间的一致性高达98%;

　　表达量可提升5-8倍;

　　Q2：在工业化生产中，适合使用哪些载体?

　　GS敲除CHO-K1宿主 + pTT5载体(EF-1α启动子)提升表达量40%

　　Q3：如何保证细胞的单克隆源性?

　　通常来说，我们会选择通过来个层面来进行验证：

　　1、实验层面。LIMEDD(有限稀释+成像)或ClonePix 2单克隆取证

　　2、基因层面。Southern Blot/NGS检测载体插入位点≤2个(符合FDA 21 CFR Part 11)

　　Q4：稳定细胞株构建的关键指标有哪些?

　　Q5：在进行双特异性抗体表达时为什么说它不可替代?

　　因为稳定细胞株构建能够保证轻/重链比例保持1:1，同时能够避免瞬时表达时容易出现的连错配的情况;

　　Q6：已上市的药品中，哪些药品主要依赖稳定细胞株生产?

　　阿达木单抗(Humira®)：CHO-SCL工艺，全球累计销售$2000亿

　　AAV基因疗法Zolgensma®：HEK293稳转株，载体滴度>1E14 vg/mL

　　当然了，很多已经实现批量生产的药物都会选择稳定细胞株的方式，而且随着技术的不断发展，各种稳定细胞株的不足之处也会得到进一步的解决，其使用范围也将越来越广泛。更多有关稳定细胞组的相关知识，敬请关注武汉普健生物。