普健生物 http://kx.atagenix.cn/ 2024-01-09
昆虫杆状病毒表达系统是蛋白表达系统中一种常用的方法,他是生物制备领域的一种强大工具,通过昆虫杆状病毒表达系统,可以高效且选择性的合成蛋白。因为昆虫表达系统常用的AcMNPV多角体病毒具备高度感染性,使得其成为表达外源基因的理想平台。
昆虫杆状病毒表达系统的原理;
1、构建载体。其实就是将目的基因插入到昆虫杆状病毒表达载体中(通常使用线性或环状的DNA质粒)。当然了,为了保证后期更好地进行跟踪,我们还需要对病毒本身基因进行选择标记工作;
2、转染宿主细胞。将构建好的表达载体转染到昆虫宿主细胞中(一般采用转染或感染的方式来实现);
3、表达。对宿主细胞进行培养,使得其开始进行转录和翻译。一般只要目标基因启动后,就会产生大量的蛋白,同时杆状病毒的DNA也会自行复制,从而形成新的病毒颗粒;
4、蛋白包装及释放。当目的蛋白合成后,我们需要对其进行翻译后修饰,然后将其包装到新生病毒颗粒中。通过对病毒颗粒的继续培养,就能获得所需目的蛋白;
昆虫杆状病毒表达系统的注意事项:
1、载体的选择。对于不同的目的蛋白要选择不同的表达载体,一定要保证表达载体与目标基因相容;
2、优化感染条件。针对不同的昆虫细胞系,其感染的条件是各不相同的,无论是时间、MOI等参数,都需要结合实际情况来进行调整;
3、优化实验设计。杆状病毒相对来说有一定的复杂性,我们需要结合实际情况和经验,对其进行合理地设计,包括对照组设置、时间点选择等过程;
对于大部分的人来说,所谓的五大表达系统也不过如此,不过就是换了个不同的动物而已,然后就是各种文字轰炸,说得多么多么困难,从而提升自己的重要性。事实不然,当我们深入了解昆虫杆状病毒系统等表达系统时,我们才会发现,其中所需要关注的细节问题不是我们所能想象的。武汉普健生物专业为广大用户提供专业的昆虫杆状病毒蛋白表达服务,如果您有相关需求,欢迎来电咨询。
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