普健生物 http://kx.atagenix.cn/ 2022-05-19
噬菌体展示技术(Phage Display Technique, PDT)是一种基因表达筛选技术,能快速淘选出与靶分子特异性结合的配体。噬菌体展示技术能将外源蛋白质或多肽的基因表达产物与噬菌体衣壳蛋白融合,并在其表面展示,同时将其遗传密码信息整合到个体噬菌体的基因组中。
1985 年,Smith 首次报道利用基因工程技术发明噬菌体展示技术,至今此项技术发展较为成熟,已广泛应用于抗原表位筛选分析、单克隆抗体的制备、药物靶点筛选、疫苗研制以及免疫学疾病诊断、治疗等多方面的科学研究领域。
噬菌体展示生物淘选流程
噬菌体筛选流程
包被抗原及对照
bio-panning
多克隆ELISA判定特异富集
单克隆ELISA(普健可做高通量96*n)
阳性克隆validated ELISA
确认克隆测序
重组抗体表达
噬菌体建库
从B淋巴细胞中扩增抗体的H链和L链基因文库,抗体片段群与噬菌体衣壳蛋白融合表达并展示于噬菌体表面,形成噬菌体展示抗体库。主要有三种类型: scFv库(由VH和VL组成,并由一个小肽(Gly4Ser)3连接成一个单链多肽)、Fab库(含有VH-CH,VL-CL,并由二硫键连接在一起)和VHH库(只有重链可变区)。
噬菌体具有独特的优势,直接将可现的表达型与其基因型联系在一 起,再利用其配体的特异性亲和力,将所感兴趣的蛋白质或多肽挑选出来。
特异性好
增殖能力强
治疗副作用小
不易产生耐药性
制备工艺简单
研发周期短
成本低廉
噬菌体优势