使用真核蛋白表达时常常会遇到哪些问题?

　　真核细胞培养在蛋白表达过程中可以说是非常重要的一环，只有细胞培养得好了，所得蛋白抗体才能在质量和数量上更具保证。但是，细胞的体外培养是一个复杂的过程，很多因素都会对其生长和繁殖造成影响。下面，普健生物和大家具体分析一下在真核细胞培养的过程中常常会遇到的一些问题。

　　1、细胞培养时出现不贴壁的情况

　　细胞培养过程中导致细胞不贴壁的原因有很多，比如胰蛋白酶消化过度、培养液中缺乏贴壁因子等等。一般出现不贴壁的情况时，我们可以通过缩短胰蛋白酶的消化时间，同时做好相关器具的清洁工作，这样就能有效的解决细胞不贴壁的情况;

　　2、细胞液的PH值迅速变化

　　在细胞培养过程中，因为一些操作方面的问题，使得培养液PH值迅速变化，常常是因为瓶盖封闭性太强、缓冲系统缓冲力不足、培养液盐浓度错误等情况。这个时候，我们可以考虑将缓冲液进行添加或减少，或者使用不以来二氧化碳的培养液，这样才能在更大程度上降低PH值的迅速变化;

　　3、细胞生长速度达不到预期

　　细胞培养过程中，出现了细胞分裂和生长过慢的情况，因为培养液搭配不当以及少量的细菌污染等情况导致。一般这个时候，我们可以考虑通过更换培养液、提升细胞起始浓度、通过抗生素除菌的方法来实现;

　　4、细胞死亡

　　培养过程中出现细胞大量死亡的情况，常常是因为培养箱中无二氧化碳、培养温度变化过快、细胞在冻存和复苏时导致细胞损伤过大的情况。这个时候，我们需要实时监测培养箱中二氧化碳的浓度以及温度监控，或者通过更换新细胞来实现;

　　5、细胞出现污染

　　一些微生物的污染会造成细胞生长过慢会死亡的情况，这个时候，我们可以考虑通过添加抗生素等情况来减少细胞污染的情况;

　　当然了，在真核细胞培养过程中会遇到各种各样的问题，但是如果我们严格按照实验室操作手册来操作的话，就能避免大部分的问题。而这些非实验操作方面的问题，则可以通过相关分析来找出问题并予以解决。普健生物专业为广大用户提供真核细胞蛋白表达服务，如果您有相关需求，欢迎来电咨询。