普健生物 http://kx.atagenix.cn/ 2022-04-25
大肠杆菌表达系统具有遗传背景清晰,培养周期短,易于放大生产,抗污染能力强等诸多优点,是目前应用最为广泛的表达系统之一。普健生物经过十多年的打磨,建立了3H(High through、High efficiency、High quality) 大肠杆菌表达系统,平台的表达成功率大于95%;独有的表达纯化以及复性平台,已成功交付上万例大肠杆菌表达服务项目。
1. 普健生物具有十几年的蛋白表达经验,15台中大型微生物培养摇床及发酵设备、12台超声破碎仪、中试型高压均质仪等配套设备,可以实现高通量,大规模大肠杆菌表达生产
2. 具有多种大肠杆菌表达载体pET系列、pGEX系列等;多种表达宿主:标准表达菌株、可增强蛋白表达的菌株T7E、表达毒性蛋白的C41、增强蛋白可溶性表达的超低温菌株Arctic、以及其它经过AtaGenix优化改造的菌株;通过不同载体和菌株的优化组合,可以实现蛋白的高效表达,蛋白表达成功率超过95%
3. 普健生物具有完善的大肠杆菌表达、纯化、内毒素控制生产线,可以生产高质量蛋白,用于细胞活性实验,动物实验等,满足高质量的蛋白使用需求
服务流程
以蛋白A为例:
1.优化表达体系,包括宿主菌、诱导温度、诱导时间、诱导剂的浓度及培养基。
宿主菌 |
诱导温度 |
诱导时间 |
诱导剂 |
培养基 |
T7E,BL21,C41,Arctic |
30℃/37℃ |
1h/4h |
IPTG |
LB/自诱导培养基 |
摇瓶的表达量为8mg/L, 随后进行了发酵条件的优化,包括培养基成分的优化、分批及补料的测试,70L 分批发酵的表达量为60mg/L
2.纯化结束用3C酶去除蛋白上的MAT标签,具体结果如图3、图4所示
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