使用大肠杆菌表达系统表达蛋白的常用步骤

　　大肠杆菌表达系统是一种常用的外源蛋白表达手段，通过将目的基因插入到表达载体中，同时通过调整启动子以及调控序列的方式，以实现目标蛋白的表达。可以说，大肠杆菌是目前使用最为广泛的表达宿主之一，通过多年的发展，大肠杆菌更适合用于转录。

　　大肠杆菌表达系统的主要步骤如下：

　　1、克隆外源基因。将想要表达的外源基因克隆到合适的大肠杆菌表达载体中;

　　2、转化大肠杆菌。将重组后的载体导入到大肠杆菌内;

　　3、蛋白诱导表达。通过添加诱导物质，诱导目的蛋白的表达;

　　4、细胞培养。筛选出合适的大肠杆菌细胞，并选择合适的培养基进行培养;

　　5、蛋白表达。培养出足够多的大肠杆菌细胞后，促使蛋白的大量表达;

　　6、蛋白纯化。通过蛋白纯化技术(如亲和层析、离子交换、凝胶过滤等)纯化目的蛋白;

　　相比其他表达系统来说，大肠杆菌表达系统的优势在于表达效率高、成本低、操作简便等，能够更加有效地获得目的蛋白。但是，用大肠杆菌表达所得的蛋白容易降解、折叠不正常等问题，在蛋白表达时，需要注意好相关问题。普健生物专业为广大用户提供蛋白表达服务，如果您有相关需求，欢迎来电咨询。