利用噬菌体展示技术挖掘兔抗体库中具有治疗作用的单克隆抗体

写在前面
近年来抗体在检测、诊断、治疗等方面发挥了越来越重要的作用。兔单克隆抗体具有比鼠源抗体活性更好且灵敏度更高、比人源抗体更易获得等优点。构建免疫噬菌体展示抗体库是目前获得兔源单克隆抗体库比较常用的方法。

兔抗体库以多克隆抗体(polyclonal antibody, pAbs)的形式被广泛应用于免疫组织化学(immunohistochemistry, IHC)、蛋白质印迹法(Western blot)、酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)和流式细胞术等免疫学研究领域，是获得高亲和力和特异性抗体的重要来源。人类和小鼠在VH-D-JH(重链)和VL-JL(轻链)基因重排后几乎完全依赖体细胞超突变来进一步多样化抗体基因，而兔的V-(D)- J重组之后是体细胞基因转换和体细胞超突变，以扩展一组和二组抗体库。此外，家兔(Oryctolagus cuuniculus)属于兔形目(Lagomorpha)，与啮齿类(Rodentia)的分类学目小鼠、大鼠等啮齿类动物在进化上距离较远。众所周知，抗原的来源与免疫动物之间种系关系越远，其抗原免疫原性越强，越易产生免疫应答；反之，种系关系越近，则抗原免疫原性越弱。因此，由于免疫耐受，鼠和人单克隆抗体(mAbs)无法识别的鼠和人抗原之间保守的表位往往可以被兔单克隆抗体(mAbs)识别。然而，大规模使用多克隆抗体的可行性受到一些因素的限制，例如在工业上稳定地复制的挑战。通过噬菌体展示或杂交瘤技术产生兔单克隆抗体的能力克服了这一限制。