普健生物 http://kx.atagenix.cn/ 2024-02-23
杂交瘤技术可以说是生物学上的技术瑰宝,在生物学领域上产生了非常深远的影响,为抗体制备提供了非常大的帮助。杂交瘤技术的基本原理是利用细胞融合技术,将免疫后的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞相结合,所得细胞即为杂交瘤细胞。这种细胞不仅能特异性制备抗体,而且能无限增殖,通过筛选和克隆,即可大批量制备抗体。
杂交瘤技术的三大关键技术:
1、动物免疫
将纯化过后的抗原注入到动物体内(如小鼠),通过多次、间断地注射,让动物在抗原的刺激下产生免疫应答反应,从而在脾脏内产生B淋巴细胞,并大量增殖。这个过程主要产生免疫后的B淋巴细胞,并实现大量增殖;
2、细胞融合术
B淋巴细胞虽然具备抗体分泌的能力,但是其本身却是一种末端分化细胞,不会再进行继续分裂,存活时间相对较短。而骨髓瘤细胞虽然不分泌抗体,但是却能无限增殖存活。所以,需要将两种细胞的特性结合起来,既能保证细胞制备抗体,又能保证其能无限增殖下去。可以说,细胞融合是杂交瘤细胞的核心技术;
3、细胞筛选术
融合的细胞我们并不能保证其都是B细胞与骨髓瘤细胞的融合体,还有可能是B细胞-B细胞、骨髓瘤细胞-骨髓瘤细胞、未融合的细胞以及多个细胞的融合体,我们需要将满足需求的杂交瘤细胞筛选出来。这个过程,我们称之为杂交瘤细胞的筛选。主要通过稀释的手段,将细胞稀释到多孔板中,让每个孔内仅含一个细胞,并对其进行培养克隆,最终选择出能够分泌特异性抗体的杂交瘤细胞;
可以说,这三个过程几乎囊括了杂交瘤细胞技术的核心过程,中间需要进行一些培养、温度调节、PH值调整等细节过程,只有做好了这些方面的工作,才能保证实验的完成。武汉普健生物专业为广大用户提供杂交瘤抗体制备服务,如果您有相关需求,欢迎来电咨询。
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