一个突破，迎来兔单抗药物研发的春天

　　兔单克隆抗体是一种通过将抗原注入到动物体内，通过启动机体内的免疫机制而产生的抗体。之后，再提取其中的B细胞，让其与骨髓瘤细胞相融合，最后通过筛选、分离和培养，产生需求的抗体。

　　兔单克隆抗体具备高亲和力、高特异性、高灵敏度，可识别更多新型表位，杂交瘤克隆数更多，人源化更简单等优势。因此，用兔单克隆抗体开发治疗用抗体药物的前景更广阔。

　　随着兔单抗药物上市，也揭开了抗体药物研发的新篇章，发展潜力不可限量。

　　兔源天然scFv库的优势

　　1. 分为κ和λ两种轻链亚型的单链抗体库，和其他商业化混合库不同，兔源天然scFv既可用于筛选κ型抗体，也可用于筛选λ型的高亲和力抗体。

　　2. 序列的正确性高，来源丰富，库容大。

　　3. 两步法建库，先连入轻链再连入重链，保证了库的高质量和多样性。

　　4. 带有His标签，可直接用phagemid表达抗体，His标签纯化。

　　案例展示

　　Rabbit ScFv phage display libraries

　　1.动物免疫：3只兔子，经四轮免疫后最终效价如下图。

　　2.兔免疫库的构建：库容可达1.01×109 pfu，插入正确率>95%，序列正确率>85%。

　　Agarose gel electrophoresis of Colony PCR, Insertion accuracy=97.6%

　　3.兔免疫库的淘选和筛选：文库经过四轮淘选富集后，我们对其进行了96个单克隆筛选，阳性克隆比例超过40%，经过对阳性克隆的测序分析，最终获得了6条不同的阳性兔单抗序列。

　　4.检测验证：将筛选得到的阳性scFv形式的抗体序列转化为完整的IgG抗体，最终进行ELISA验证。