盘点抗体亲和力成熟的技术手段?

　　抗体亲和力成熟(antibody affinity maturation)是一种机体存在的一种正常的免疫功能状态，指的是在免疫过程中再次应答所产生的抗体药高于初次免疫应答的现象。而所谓的抗体亲和力（ATAGENIX），则指的是抗体与抗原结合的牢固程度，一般来说，成熟抗体在亲和力上要高于未成熟的抗体。

　　我们知道，抗体在体外成熟的过程中，选择突变区域以及引入突变的引入是非常关键的。所以，抗体亲和力成熟的的技术手段主要有哪些?

　　1、易错PCR

　　易错PCR是一种常见的突变手段，在聚合酶对目的基因进行扩增时，可以通过应用错配率高的聚合酶及调整反应条件等手段，并通过多轮PCR来提升突变率;

　　2、链置换

　　链置换是通过保留某一个特定抗体的重链或是轻链，而后对另外一条链进行随机互补链组合，而后从这其中筛选出来，获得更多高活性的突变株;

　　3、定点突变

　　一般来说，在天然抗体亲和力成熟的过程中，体细胞发生突变的区域分步并不均匀，主要集中在CDR区。所以，在抗体其合理成熟的过程中，我们可采用CDR区来进行定点突变，这样不仅能保持序列的多样性，而且不会破坏蛋白的结构;

　　4、DNA改组

　　DNA改组技术其实就是对同源抗体基因进行片段切割，而后再随机组合进行PCR扩增。这个过程包含了抗体片段的切割、重组、筛选等过程，在一定程度上模拟天然抗体亲和力成熟的过程，而且能够加快体外进化速度;

　　抗体亲和力成熟可以说是机体免疫的一个重要过程，而且在抗体制备过程中有着非常重要的意义。虽然现阶段抗体亲和力成熟的技术手段相对来说还是较少，但是相信在不久的未来将会有更多的技术手段应运而生。武汉普健生物专业为广大用户提供蛋白表达服务，如果您有相关需求，欢迎来电咨询。