盘点抗体开发过程中的一些常见问题及其解决办法

　　我们在进行相关抗体开发的时候，真是就那么一帆风顺?是不是有些时候同样的操作，却怎么也制备不出所需抗体，从头查看一遍后，又发现完全没什么问题?有鉴于此，普健生物今天在这里和大家具体聊聊有关抗体开发过程中的一些常见问题，希望对大家抗体制备有一定的帮助。

　　1、怎么确定是制备单抗还是多抗?

　　这个主要看需求。多抗简单来说，可以看做是多种单抗的混合物，看具体是要针对多个表位还是单个表位的，根据特异性需求进行查看;

　　2、各种不同类型的抗体的区别体现在哪些方面?

　　WB：可以说是最常做的类型，WB识别的蛋白是经过加热变性之后都变成线性结构的蛋白;

　　IHC：免疫组化中需要进行固定一步，固定是为了尽量让细胞的形态结构维持和原有的一致。这种化学物质的固定使蛋白质变性凝固，与天然状态下的蛋白质有了一定的区别，但是又不同WB中加热变性变成了线性的结构。

　　IP/ChIP：这类实验是用抗体去结合生理状态下的蛋白质，因此IP和ChIP的抗体最好使用纯化的天然蛋白制作的抗体。

　　3、一抗一般使用哪种浓度的?

　　一般来说，抗体制备报告中都会有推荐浓度，只是因为所选操作平台以及试剂体系方面的不同，导致其制备的一抗浓度存在着一定的差异。所以，我们在制备抗体是可以结合自己的实验平台来进行测试，以便于达到最佳效果浓度;

　　4、如何选择二抗?

　　简单来说，所选二抗，只要能够抗所有一抗的宿主即可;

　　5、如何保证抗体?

　　一般来说，我们需要结合抗体的特性来进行抗体的保存，就现阶段来说，所得抗体按照说明书相关要求保存即可;

　　6、抗体要如何分装?

　　结合实验剂量进行一次性分装。当然了，如果可以在一周内完成实验，可以直接分装出所需抗体量，4度环境下保存，如果收起过长，则添加50%甘油，-20度保存，其余抗体可在-80度保存;

　　抗体制备过程中常常会遇到各种各样的问题，我们需要按照实验标准进行精细化操作，只有这样，才能在更大程度上保障抗体制备的完成。武汉普健生物专业为广大用户提供抗体制备服务，如果您有相关需求，欢迎来电咨询。