什么是流式抗体？它是如何生产的？

　　所谓的流式抗体其实和流式细胞术是一样的，其就是以流式细胞仪作为检测的手段，能够同时检测单个微粒(单细胞悬液、生物颗粒等)的多项特性，也可以对特定群体进行分选，其结果快速、准确并而且客观。

　　那么，流式抗体具备哪些方面的优势呢?

　　1、结果能保持一致：能以流式细胞术为理论基础，集流体力学、激光技术、电子工程学、分子免疫学、细胞荧光化学和计算机为一体，可对高速直线流动的细胞或生物微粒进行快速定量测定和分析。

　　这个方法在生物学中也有着广泛的应用，可以对细胞凋亡、细胞增殖、细胞内钙离子浓度、细胞膜电位，细胞表面分子、细胞核酸、细胞内活性氧水平、细胞内或细胞核内抗原等进行检测与分析!

　　2、拥有完善可靠的工作原理

　　虽然说我们选择流式抗体无法做到像流式细胞仪那样快速高效准确，但是我们也可以利用流式细胞术的操作流程，毕竟这个方法也非常成熟了。

　　流式抗体的常规的操作流程：

　　1、样品制备

　　培养的贴壁细胞。需用0.25%胰蛋白酶(不含EDTA)消化、PBS洗涤、固定液重悬或者低温保存待用。

　　新鲜组织

　　需消化成单细胞悬液(酶处理法、机械法)：消化、生理盐水洗涤、滤网过滤、固定液重悬或者低温保存待用。

　　石蜡包埋组织

　　先将蜡块切成10-50 um厚的组织片、研磨、脱蜡、水化，再消化、生理盐水洗涤、滤网过滤、固定液重悬或者低温保存待用。

　　2、荧光抗体标记

　　直接染色

　　细胞直接结合标记好荧光染料的抗体。它的优点是操作简单，降低二抗的非特性结合背景。

　　间接染色

　　细胞与不是荧光标记的一抗结合再与带荧光标记的二抗结合来检测。

　　3、流式细胞仪上机检测及数据分析

　　如果听了很多道理，

　　仍然过不好自己的一生，

　　可能是因为那些道理不够真。

　　求经验，也要看对象。

　　接下来，普健生物结合多年的实验经验，和大家分享一些流式抗体的常见问题。

　　1、如何选择合适的荧光抗体?

　　荧光标记流式抗体的方式包括直接标记和间接标记两种。间接标记二抗会增加实验步骤、清洗多次造成细胞浪费，会影响实验的准确性，所以在流式实验过程中，尽量选用直接标记的抗体进行实验，尽量减少实验工序和过程，保证实验的真实性和准确性。

　　2、实验过程中是否需要设置同型对照?

　　同型对照是使用与一抗相同种属来源、相同亚型、相同剂量和相同的免疫球蛋白及亚型的免疫球蛋白，用于消除由于抗体非特异性与细胞结合而产生的背景染色。同型对照是真正意义上的阴性对照，对流式细胞术不是非常熟悉的人员，根据同型对照可以判断阳性细胞的位置;一些特异性不高的抗体(如多抗)，非特异性结合非常多，使用同型对照可排除假阳性，因此同型对照的设置是需要的。

　　总的来说，流式抗体的使用非常广泛，而且在未来的使用中也会更加的频繁。普健生物为广大用户提供专业的流式抗体服务，如果您有相关需求，欢迎前来咨询。