重组蛋白表达时出现表达异常的情况及解决方案

　　重组蛋白作为重要的生物制药产物，在医学中用着显著的作用。但是，往往在我们进行相关蛋白表达时，常常会因为这样或那样的原因导致蛋白表达失败，这个时候，我们需要从头对蛋白进行相关分析，确定表达过程中的问题。有鉴于此，普健生物在这里和大家具体聊聊。

　　1、方案设计问题。我们在设计时，因为设计不合理，比如密码子位移、信号肽问题、GC含量太高、蛋白大小等问题，导致蛋白表达失败的情况。这个时候，我们需要在相关范围内控制好，这样才能实现蛋白的表达;

　　2、质粒构建中的问题。质粒构建过程中，常常会因为一些失误导致蛋白表达失败。所以，当我们完成质粒构建后，除了需要进行基本的酶切鉴定和PCR鉴定外，我们还需要进行测序确认，确保不会出现突变、确实、多余等情况;

　　3、蛋白降解问题。很多时候并非蛋白没有表达，而是表达后降解了。所以，我们需要添加相关抑制酶，降低蛋白的降解;

　　4、培养基问题。很多蛋白在LB培养基中不会表达，需要替换成其他培养基才行;

　　5、蛋白毒性问题。有些重组蛋白自带毒性，会对蛋白表达造成影响。这个时候，我们需要考虑更加严谨的蛋白表达系统;

　　6、分子量异常问题。蛋白的分子量与预期存在一定的偏差，这个时候我们需要仔细对比诱导/非诱导蛋白带谱差异，需要结合相关数据进行判断;

　　因为重组蛋白相对天然蛋白来说，在结构上有着极大的差别，所以，在稳定性上有着一定的不足。所以，无论是在设计上，还是在中间过程以及保存上都需要针对性设计。当然了，重组蛋白表达中会遇到的问题远不止如上这些，正常表达时都会因为这样或那样的问题导致表达失败，所以，我们需要在细节方面更加在意，这样才能在更大程度上实现蛋白表达。武汉普健生物专业为广大用户提供重组蛋白表达服务，如果您有相关需求，欢迎来电咨询。